弹性扩散板的制备程序
该程序足以制备10个弹性扩散板.
所需的材料
1. Elastin-Fluorescein或Elastin-Rhodamine,粒径超过400目(小于37微米)
2. 琼脂,高纯度
3. 丙酮,试剂级
4. 缓冲区,0.2 M Tris pH 8.8在37℃含0.02% NaN3
5. 10cm²一次性塑料培养皿. 十个要求
6. 配有磁力搅拌器的热板.
过程
1. 在一个干燥的250毫升烧瓶中,加入600毫克底物. 加入5毫升丙酮,轻轻旋转,使所有颗粒都湿润. 加入100毫升缓冲液并旋转直至所有颗粒分散. 加热并搅拌至90º-95ºC以排出丙酮. 冷却至80摄氏度左右.|
2. 加上2.5克琼脂,加热搅拌至悬浮液沸腾. 降低温度,保持温度在85º-95ºC.
3. 不要用嘴移液. 将10ml热悬液放入水平培养皿底部. 盖上盖子,冷却至室温.
4. 在凝固的凝胶上开4mm的孔. 用一块方形聚乙烯薄膜覆盖凝胶表面. 在胶片上放一圈水饱和的滤纸. 将盘子盖上并密封在一个聚乙烯袋中. 储存2º-5ºC. 不要冻结. 稳定约4个月.